Stabilized soluble-dependent nitrate reductase, method for its production and its use

Abstract

Abstract Translated from German Eine neue stabilisierte NAD(P)H-abhängige lösliche Nitrat- reduktase vom assimilatorischen Typ weist ein Molekulargewicht von etwa 90 000 D und eine Restaktivität nach drei Wochen bei 35°C von mehr als 60% auf und ist erhältlich, indem man eine Suspension des zerkleinerten Ausgangsmaterials in Tris-Weinsäurepuffer pH 7 bis 8,5 herstellt, dieser lösliches Polyethylenimin in solcher Menge zusetzt, daß 10 bis 20% der Nitratreduktaseaktivität in die auftretende Fällung übergehen, die Fällung abtrennt und den Überstand nach üblichen biochemischen Fraktionierungsmethoden im obigen Aufschlußpuffer aufarbeitet, die erhaltene Enzymlösung dialysiert und in einem zwitterionischen Puffer lyophilisiert. Sie eignet sich zur Bestimmung von Nitrat. A new stabilized NAD (P) H-dependent soluble nitrate reductase of the assimilatory type has a molecular weight of approximately 90,000 D and a residual activity after three weeks at 35 ° C. of more than 60% and can be obtained by using a suspension of the comminuted starting material in Tris-tartaric acid buffer pH 7 to 8.5, adds this soluble polyethyleneimine in such an amount that 10 to 20% of the nitrate reductase activity passes into the precipitate which occurs, the precipitate is separated off and the supernatant is worked up in the above digestion buffer according to customary biochemical fractionation methods, the enzyme solution obtained is dialyzed and lyophilized in a zwitterionic buffer. It is suitable for the determination of nitrate.

Inventors

• 👤 Stephan Dr. Rer. Nat. Fischer
• 👤 Bärbel Wurst
• 👤 Hans-Otto Dr. Rer. Nat. Beutler
• 👤 Georg-Burkhard Dr. Rer. Nat. Kresse
• 👤 Herwig Dr. Brunner

Bibliographic Details