Method for preparing stabilized carrier-bound proteins

Abstract

Abstract Translated from German Stabilisierte trägergebundene Proteine werden durch Umsetzung eines Proteins in wäßriger Lösung mit einem wasserunlöslichen, merkaptogruppen-freien Trägermaterial, das gegenüber Proteinen bindungsaktive Gruppen enthält, und durch nachfolgende Einwirkung von Schwefelwasserstoff oder von vorzugsweise aliphatischen Verbindungen mit einem Molekulargewicht unter 5000, vorzugsweise unter 2000, mit wenigstens einer Merkaptogruppe und wenigstens einer weiteren Merkapto-, Hydroxyoder primären oder sekundären Aminogruppe erhalten. Vorzugsweise wird ein perlförmiges Trägermaterial mit einem Perldurchmesser zwischen 5 und 1000 µm auf Basis eines vernetzten Polyacrylamids mit Oxirangruppen oder cyanbromierte Cellulose, Agarose oder Dextrane mit einem Enzym, z.B. Penicillinacylase umgesetzt. Anschließend werden wenigstens 0,03 Gew.-% an freien Merkaptogruppen an das Trägermaterial angelagert. Die Produkte zeichnen sich durch verminderten Abbau der biologischen Aktivität bei vielfacher Wiederverwendung des gebundenen Proteins aus. Stabilized carrier-bound proteins are obtained by reacting a protein in aqueous solution with a water-insoluble, mercapto group-free carrier material, which contains groups that bind to proteins, and by subsequent exposure to hydrogen sulfide or preferably aliphatic compounds with a molecular weight below 5000, preferably below 2000, with at least a mercapto group and at least one further mercapto, hydroxy or primary or secondary amino group. Preferably, a bead-shaped carrier material with a bead diameter between 5 and 1000 µm based on a cross-linked polyacrylamide with oxirane groups or cyanbrominated cellulose, agarose or dextrans with an enzyme, e.g. Penicillin acylase implemented. Then at least 0.03% by weight of free mercapto groups are added to the carrier material. The products are characterized by reduced degradation of biological activity with multiple reuse of the bound protein.

Inventors

• 👤 Dieter Dr. Krämer
• 👤 Klaus Dr. Sauber

Bibliographic Details